一般HPLC分析常用六通進(jìn)樣閥，其關(guān)鍵部件由圓形密封墊（轉子）和固定底座（定子）組成。由于閥接頭和連接管死體積的存在，柱效率低于隔膜進(jìn)樣（約下降5-10%左右），但耐高壓（35-10MPa），進(jìn)樣量準確，重復性好（0.5%），操作方便。 進(jìn)樣裝置要求：密封性好，死體積小，重復性好，保證中心進(jìn)樣，進(jìn)樣時(shí)對色譜系統的壓力、流量影響小。

         

液相色譜進(jìn)樣器有手動(dòng)和自動(dòng)兩種，隨著(zhù)系統自動(dòng)化的推進(jìn)，自動(dòng)進(jìn)樣器已漸趨普及。但是手動(dòng)進(jìn)樣閥的使用量還是比較大的，尤其是在企業(yè)中。我們平時(shí)在使用手動(dòng)進(jìn)樣閥進(jìn)樣時(shí)，一般并沒(méi)有特別留意，但，如果使用方法不當，也會(huì )引起色譜圖上出現不良峰型、做標準曲線(xiàn)時(shí)線(xiàn)性關(guān)系差、產(chǎn)生漏液等現象，導致分析出現異常。這里以7725型手動(dòng)進(jìn)樣器為例，簡(jiǎn)述避免故障，正確使用的注意事項。
 
一、手動(dòng)進(jìn)樣六通閥結構
 
7725型手動(dòng)進(jìn)樣閥是目前使用zui廣泛的高壓平面進(jìn)樣閥。其結構如上圖所示。它由定子、轉子密封墊、轉子、手柄等組成，在定子上刻有6個(gè)號碼，在安裝時(shí)，將5號和6號用附屬的管路連接。注意：2號必須與泵相連接，3號必須與柱相連接。在（load）的狀態(tài)（手柄向左旋）下，流動(dòng)相不經(jīng)過(guò)定量環(huán)直接進(jìn)入柱，此時(shí)用微量注射器注入樣品，樣品液流入定量環(huán)，過(guò)量的樣品液從排液管（廢液管）流入廢液瓶。接著(zhù)進(jìn)樣（手柄向右旋）處于（Inject）時(shí)，由于轉子的旋轉，定量環(huán)與3號排出管路相接，定量環(huán)中的樣品液被送入柱中。
 
二、液相色譜儀進(jìn)樣操作
 
進(jìn)樣的方法有環(huán)路全量進(jìn)樣和部分進(jìn)樣兩種。標準附屬的定量環(huán)為20 µl或10 µl，如果用約50~100 µl的微量注射器注入全量的話(huà)，則環(huán)路被清洗，并且環(huán)路被樣品完全充滿(mǎn)。如果用此方法進(jìn)樣，則屬于“環(huán)路進(jìn)樣”能保證有20 µl樣品量注入，這樣做重現性較好。這就是全量進(jìn)樣的方法。一般定量分析均采用此方法進(jìn)樣。部分進(jìn)樣的方法是在以環(huán)路容量作為zui大的范圍下，通過(guò)微量注射器注入樣品進(jìn)行進(jìn)樣。采用此方法微量注射器的計量誤差將嚴重影響重現性，但也有其有利性，樣品的配制濃度可以較高，尤其適用于定性分析。不論何種方法，使用7125型進(jìn)樣器時(shí)，不必取下微量注射器，轉動(dòng)把手即可進(jìn)樣。為了保持針端的密封形狀準確，平時(shí)請將微量注射器或附帶的針插上。
 
三、手動(dòng)進(jìn)樣六通閥的清洗和保養
 
留在進(jìn)樣閥注射針導入口的殘余樣品易引起交叉污染（Cross Contamination），在重復進(jìn)樣時(shí)會(huì )給工作帶來(lái)影響。在正常情況下不必每次進(jìn)樣后都沖洗進(jìn)樣閥注射針導入口。但是，在進(jìn)樣針頭插入或拔出過(guò)程中，會(huì )有痕量的樣品沉積在針頭密封區域，這樣，就需要在工作結束時(shí)或進(jìn)樣間歇時(shí)，用附帶的聚四氟乙烯針和注射頭注入水或甲醇、乙腈清洗進(jìn)樣閥注射針導入口，此時(shí)進(jìn)樣閥手柄應向右轉處于（Inject）位，注意不要把針頭插入。
 
注意：當進(jìn)過(guò)高濃度樣品時(shí)，更要及時(shí)清洗。
 
四、手動(dòng)進(jìn)樣六通閥漏液的產(chǎn)生原因和處理
 
1、長(cháng)期使用后，因為轉子的旋轉，其與定子的摩擦，會(huì )產(chǎn)生轉子密封墊的磨損，產(chǎn)生漏液。此時(shí)漏液亦可能向其他流路泄漏，導致色譜圖的異常。
 
處理方法：更換7725型的轉子密封墊。
 
2、密封墊表面有劃痕。
 
在更換進(jìn)樣閥密封圈時(shí)，你會(huì )發(fā)現密封圈上有細微的劃痕。漏液就是由這些劃痕引起的。這是因為，有些微量注射器的表面不夠光滑（肉眼是看不出的），進(jìn)樣時(shí)，在密封圈上留下的。
 
建議：使用進(jìn)口或質(zhì)量好的微量注射器，以減少進(jìn)樣閥密封圈的受損幾率和更換頻率。還有，當流動(dòng)相中存在微小的固體時(shí)，或者是鹽析出，都會(huì )在進(jìn)樣閥密封圈表面留下劃痕。因此，流動(dòng)相要在使用前過(guò)濾;使用含鹽的緩沖液作流動(dòng)相時(shí)，要注意鹽的析出，并及時(shí)用水沖洗。
 
五、其它
 
1、耐壓性
 
7725型的耐壓為350Kgf/cm2。通常這已經(jīng)足夠了，但如有特殊的使用目的，可以通過(guò)增緊定子螺栓來(lái)達到500Kgf/cm2的耐壓規格。不過(guò)為延長(cháng)使用期，建議在較低耐壓規格下使用為宜。
 
2、密封圈材質(zhì)
 
一般，7725型的密封材料使用的是被稱(chēng)作BESPEL®的聚酰亞胺，因此不可用于pH10以上的堿性流動(dòng)相。此外，自動(dòng)進(jìn)樣器SIL-10A、10Avp上用的也是BESPEL®。
 
譜析友情提示：在每次使用后，尤其是進(jìn)濃度差異比較大的樣品時(shí)要用專(zhuān)用工具（不是帶針頭的注射器）沖洗進(jìn)樣閥，沖洗時(shí)必須沖洗進(jìn)樣閥兩頭數次，每次數毫升。以防止無(wú)機鹽沉積和樣品微粒造成閥內部磨損或阻塞以及樣品的交叉污染。要使用專(zhuān)用的液相注射器進(jìn)樣，注射器前應用專(zhuān)用的樣品過(guò)濾器。