液相色譜儀安裝條件注意事項
安裝液相色譜儀的實(shí)驗臺應水平、穩固、并具有足夠的放置空間。避免在具有腐蝕性氣體、大量灰塵或能產(chǎn)生強磁場(chǎng)的地方安裝本儀器,否則將會(huì )影響儀器的正常運轉及縮短儀器的使用壽命。
應安裝四個(gè)以上三芯電源插座(220V,5~10A),**具有專(zhuān)門(mén)的接地線(xiàn)(注意,絕不能將電源線(xiàn)的中線(xiàn)作為接地線(xiàn)),并確保輸出電源的電壓穩定,否則會(huì )導致儀器的不正常運作。
如果實(shí)驗室無(wú)專(zhuān)用的接地線(xiàn),一般可用Φ15~20mm的銅棒打入地下1~1.5米,用Φ1.2mm左右的塑膠單股導線(xiàn)連接到電源插座的接地端。
如果實(shí)驗室電壓不穩定,應使用穩壓器等必要設備,使電源電壓穩定。
實(shí)驗室的室溫應控制在15℃-30℃范圍內,并且波動(dòng)要??;濕度在45~85%范圍內。
由空調或其他設備產(chǎn)生的氣流不要直吹儀器,避免光線(xiàn)直射及振動(dòng)。
液相色譜儀的啟動(dòng)順序:先開(kāi)高壓恒流泵和紫外檢測器,待紫外檢測器自檢完畢,回到默認波長(cháng)254nm后,再開(kāi)計算機及打開(kāi)工作站軟件。
液相色譜儀關(guān)閉順序:先按泵停止,關(guān)閉氘燈,退出工作站軟件,然后再關(guān)儀器。
液相色譜儀應由專(zhuān)人負責,如果使用人員不固定,請準備《儀器使用登記本》,以明確使用情況,及時(shí)處理和保養。
流動(dòng)相使用的注意事項
液相色譜儀**使用HPLC級或相當于該級別的流動(dòng)相,并要先經(jīng)0.45μm薄膜過(guò)濾。
過(guò)濾后的流動(dòng)相**經(jīng)過(guò)充分脫氣,以除去其中溶解的氣體(如O2),如不脫氣易產(chǎn)生氣泡,增加基線(xiàn)噪聲,造成靈敏度下降,甚至無(wú)法分析。
幾中脫氣方法比較:
1. 氦氣脫氣法:利用液體中氦氣的溶解度比空氣低,連續吹氦脫氣,效果較好,但成本高。
2. 加熱回流法:效果較好,但操作復雜,且有毒性揮發(fā)污染。
3. 抽真空脫氣法:易抽走有機相
4. 超聲脫氣法:一種較為常見(jiàn)的脫氣法。流動(dòng)相放在超聲波容器中,用超聲波震蕩10~15分鐘,此法效果并不是太好,但操作簡(jiǎn)單。
如果管路中使用peek樹(shù)脂部件,請不要使用下列流動(dòng)相:
濃硫酸、濃硝酸、二氯乙酸、丙酮、四氫呋喃、二氯甲烷、氯仿和二甲基亞砜
特別注意
含有緩沖鹽溶液的流動(dòng)相的清洗方法:
1. 先用10︰90的甲醇/水沖洗,以洗去緩沖鹽,清洗時(shí)間至少為一小時(shí)。
2. 再用70︰30的甲醇/水沖洗系統,清洗時(shí)間至少為40分鐘。
3.將系統保存在純甲醇中。
流動(dòng)相的更換
在分析過(guò)程中,有時(shí)需要更換流動(dòng)相進(jìn)行分析。一定要注意前一種使用的流動(dòng)相和所更換的流動(dòng)相是不是能夠相溶。如果前一種使用的流動(dòng)相和所更換的流動(dòng)相不能夠相溶,那您就要特別注意了。要采用一種與這二種需更換的流動(dòng)相都能夠相溶的流動(dòng)相進(jìn)行過(guò)渡、清洗。較為常用的過(guò)渡流動(dòng)相為異丙醇,但實(shí)際操作中要看具體情況而定,原則就是采用與這二種需更換的流動(dòng)相都能夠相溶的流動(dòng)相。一般清洗的時(shí)間為30~40分鐘,直至系統完全穩定。
如不進(jìn)行以上“特別注意”上述步驟的操作,將會(huì )導致系統管路堵塞。嚴重時(shí)將引起流通池污染堵塞,不得不更換流通池。用戶(hù)就要承擔不必要的損失了。
儲液器的注意事項
保持流動(dòng)相儲液器的清潔是保證液相色譜儀正常使用的關(guān)鍵。要使用HPLC級的溶劑,對試劑含有緩沖鹽及非HPLC級的流動(dòng)相一定要用0.45μm過(guò)濾器除去其中的微粒物質(zhì)。