在操作高效液相色譜儀時(shí)，有沒(méi)有為老是出現氣泡而崩潰？有沒(méi)有為超聲波震蕩了一個(gè)小時(shí)，流動(dòng)相還出現氣泡，而暈倒？有沒(méi)有為天氣晴好的時(shí)候沒(méi)出現氣泡，陰天、下雨天，同一瓶，出現了氣泡，而對自己的工作失去信心？

在操作高效液相色譜時(shí)，流動(dòng)相出現氣泡，那整個(gè)工作就沒(méi)法進(jìn)行了。
超聲波震蕩了一個(gè)小時(shí)的流動(dòng)相，為什么天氣晴好的時(shí)候沒(méi)出現氣泡，陰天、下雨天就會(huì )出現；是因為陰天、下雨天空氣氣壓下降，引起溶在流動(dòng)相中的空氣過(guò)飽和（晴天時(shí)氣壓高還沒(méi)飽和），當高壓泵抽取流動(dòng)相時(shí)，空氣析出，產(chǎn)生了氣泡。
超聲波震蕩了一個(gè)小時(shí)的流動(dòng)相，為什么里面還有空氣呢？這是由于在常壓下震蕩，驅趕空氣效果不行。
如果把裝流動(dòng)相的瓶子進(jìn)行抽真空，同時(shí)進(jìn)行超聲波震蕩，效果會(huì )怎么樣呢？效果非常好，只要1min，流動(dòng)相中的空氣差不多沒(méi)了；經(jīng)過(guò)這樣驅逐空氣的流動(dòng)相，陰天、下雨天使用也不會(huì )出現氣泡了；而且省時(shí)，不用動(dòng)不動(dòng)半小時(shí)、一小時(shí)超聲波震蕩；并且效果非常好。
由于氣泡的存在，會(huì )造成色譜圖上出現尖銳的噪聲峰，嚴重時(shí)會(huì )造成分析靈敏度下降；氣泡變大進(jìn)入流路或色譜柱時(shí)會(huì )使流動(dòng)相的流速變慢或不穩定，使基線(xiàn)起伏。
造成上述現象的主要原因有三條：
一是流動(dòng)相溶液中往往因溶解有氧氣或混入了空氣而形成氣泡；
二是系統開(kāi)始工作時(shí)未能將流路中的空氣驅趕干凈；
三是在注入樣品時(shí)不注意混入了空氣。
而液相色譜儀在使用中，整個(gè)液路系統有兩個(gè)地方易產(chǎn)生氣泡！
1、泵頭吸液白管;2、檢測口流通池。
氣泡產(chǎn)生的原因大多數是因為：
溫度上升，壓力下降！溫度上升或柱溫上升，當接近試劑沸點(diǎn)時(shí)，試劑汽化產(chǎn)生氣泡，試劑中已含微小氣泡，因加熱變大而產(chǎn)生氣泡。
壓力下降產(chǎn)生氣泡，流動(dòng)相中一直包含微小氣泡，無(wú)論超聲過(guò)濾，均不能池底去掉它，那么當壓力下降時(shí)，微小氣泡將長(cháng)大，且多個(gè)小氣泡易聚集成大氣泡，而影響正常實(shí)驗。
氣泡產(chǎn)生原因及解決辦法
一、泵頭及吸液白管
1、泵頭
泵頭是壓力變化最劇烈的地方，也是最易產(chǎn)生氣泡的地方，泵頭靠負壓而吸液，而負壓必然使流動(dòng)相中的小氣泡長(cháng)大，當泵腔變正壓時(shí)，已長(cháng)大的氣泡未必能全部變小流入后續液路，則泵腔內將積存氣泡，從而影響吸液精度，鑒于此，泵頭上專(zhuān)門(mén)設計了排氣閥，便于泵頭排氣，觀(guān)察柱壓穩定了說(shuō)明泵頭排氣成功。
2、吸液白管長(cháng)氣泡。
a、吸液白管接觸空氣部位漏氣，產(chǎn)生可見(jiàn)氣泡，吸液白管是常壓和負壓交臂變化部位，其漏表現為大氣進(jìn)入白管內，而不易見(jiàn)到管內液體漏出。
處理方法：更換白管。
b、濾頭堵：濾頭堵使得液體流入濾頭的速度下降，泵強制吸液而產(chǎn)生真空氣泡。
判斷：拔掉濾頭不再長(cháng)氣泡則是濾頭堵。
處理：A、30%硝酸水液超洗濾頭，20分鐘左右。B、水超洗濾頭，注意換水多超幾次。
c、流動(dòng)相汽化產(chǎn)生氣泡。
尤其是夏天室溫高，沸點(diǎn)低的試劑易汽化，比如：乙酸，乙醚，氨水，石油醚等易于汽化。
處理：超聲，降室溫。
二、檢測流通池長(cháng)氣泡
流通池是易積存氣泡的地方，其對基線(xiàn)影響巨大，流動(dòng)相流入色譜柱后，壓力越來(lái)越小，微小氣泡將逐漸長(cháng)大，而流通池截面積遠大于鋼管面積，則氣泡在池內易長(cháng)大，氣泡的特點(diǎn)是長(cháng)大在無(wú)外壓的情況下，很難縮小到鋼管內經(jīng)以下流出流通池，所以它就存在了池內。處理方法：對于示差檢測器（示差檢測器池只能耐幾個(gè)公斤壓力），只能是反復沖洗斥資，舉高廢液瓶靠廢液管內液柱給池加一個(gè)微小反壓，所以這就靠成了示差池子排氣困難些，但無(wú)它法。
為了避免這類(lèi)問(wèn)題的出現，液相色譜實(shí)際分析過(guò)程中必須重視對流動(dòng)相進(jìn)行脫氣處理。
常用的脫氣方法有以下幾種：
1、吹氦脫氣法 使用在液體中比空氣溶解度低的氦氣，在0.1Mpa壓力下，以約60ml/min流速通入流動(dòng)相10-15min以驅除溶解的氣體。此法使用于所有的溶劑，脫氣效果較好，但在國內因氦氣價(jià)格較貴，本法使用較少；
2、加熱回流法 此法的脫氣效果較好；
3、抽真空脫氣法 此時(shí)可使用微型真空泵，降壓至0.05-0.07MPa即可除區溶解的氣體。顯然使用水泵連接抽濾瓶和G4微孔玻璃漏斗可一起完成過(guò)濾機械雜質(zhì)和脫氣的雙重任務(wù)。由于抽真空會(huì )引起混合溶劑組成的變化，故此法適用于單一溶劑體系脫氣。對多元溶劑體系應預先脫氣后再進(jìn)行混合，以保證混合后的比例不變。
4、超聲波脫氣法 它是目前實(shí)驗室使用最廣泛的脫氣方法，將配制好的流動(dòng)相連同容器一起放入超聲波水漕中脫氣10-20min即可。該方法操作簡(jiǎn)便，基本能滿(mǎn)足日常分析的要求。
5、在線(xiàn)真空脫氣法 把真空脫氣裝置串聯(lián)到儲液系統中，并結合膜過(guò)濾器，實(shí)現了流動(dòng)相在進(jìn)入輸液泵前的連續真空脫氣。此法的脫氣效果明顯優(yōu)于上述幾種方法，并適用于多元溶劑體系。
其二，在液相色譜系統開(kāi)始工作前，可以用注射器連接恒流泵的排空閥，抽入流動(dòng)相，將流路中的空氣驅趕干凈。
其三，在注入樣品前注意排出樣品注射器中的空氣。