國產(chǎn)液相色譜儀使用HPLC級或相當于該級別的流動(dòng)相,并要先經(jīng)0.45μm薄膜過(guò)濾。過(guò)濾后的流動(dòng)相經(jīng)過(guò)充分脫氣,以除去其中溶解的氣體(如O2),如不脫氣易產(chǎn)生氣泡,增加基線(xiàn)噪聲,造成靈敏度下降,甚至無(wú)法分析。
國產(chǎn)液相色譜儀幾中脫氣方法比較:
1. 氦氣脫氣法:利用液體中氦氣的溶解度比空氣低,連續吹氦脫氣,效果較好,但成本高。
2. 加熱回流法:效果較好,但操作復雜,且有毒性揮發(fā)污染。
3. 抽真空脫氣法:易抽走有機相
4. 超聲脫氣法:一種較為常見(jiàn)的脫氣法。流動(dòng)相放在超聲波容器中,用超聲波震蕩10~15分鐘,此法效果并不是太好,但操作簡(jiǎn)單。
如果管路中使用peek樹(shù)脂部件,請不要使用下列流動(dòng)相:
濃硫酸、濃硝酸、二氯乙酸、丙酮、四氫呋喃、二氯甲烷、氯仿和二甲基亞砜
特別注意
含有緩沖鹽溶液的流動(dòng)相的清洗方法:
1. 先用10︰90的甲醇/水沖洗,以洗去緩沖鹽,清洗時(shí)間至少為一小時(shí)。
2. 再用70︰30的甲醇/水沖洗系統,清洗時(shí)間至少為40分鐘。
3. 將系統保存在純甲醇中。
國產(chǎn)液相色譜儀流動(dòng)相的更換
在分析過(guò)程中,有時(shí)需要更換流動(dòng)相進(jìn)行分析。一定要注意前一種使用的流動(dòng)相和所更換的流動(dòng)相是不是能夠相溶。如果前一種使用的流動(dòng)相和所更換的流動(dòng)相不能夠相溶,那您就要特別注意了。要采用一種與這二種需更換的流動(dòng)相都能夠相溶的流動(dòng)相進(jìn)行過(guò)渡、清洗。較為常用的過(guò)渡流動(dòng)相為異丙醇,但實(shí)際操作中要看具體情況而定,原則就是采用與這二種需更換的流動(dòng)相都能夠相溶的流動(dòng)相。一般清洗的時(shí)間為30~40分鐘,直至系統完全穩定。
如不進(jìn)行以上“特別注意”上述步驟的操作,將會(huì )導致系統管路堵塞。嚴重時(shí)將引起流通池污染堵塞,不得不更換流通池。用戶(hù)就要承擔不必要的損失了。
國產(chǎn)液相色譜儀儲液器的注意事項
保持流動(dòng)相儲液器的清潔是保證液相色譜儀正常使用的關(guān)鍵。要使用HPLC級的溶劑,對試劑含有緩沖鹽及非HPLC級的流動(dòng)相一定要用0.45μm過(guò)濾器除去其中的微粒物質(zhì)。