檢測(cè)器是液相色譜系統(tǒng)的“眼睛”，測(cè)量離開(kāi)柱的樣品的濃度或質(zhì)量。光電檢測(cè)器測(cè)量柱流出物的光吸收、熒光和折光率的變化。電化學(xué)和電導(dǎo)檢測(cè)器溶液的變化。特殊的樣品用特殊的檢測(cè)器。不合適的檢測(cè)器測(cè)得的結(jié)果也不可靠。
具體故障與解決
燈故障主要是燈失靈或能量衰減以及燈引起基線(xiàn)噪音。
除EC外，檢測(cè)器中燈是重要部件。燈失靈，明顯地引起檢測(cè)器信號(hào)總下降。多數(shù)檢測(cè)器有觀察孔或指示器，由此可看見(jiàn)燈工作的情形。但是不可以直接觀察紫外燈，因?yàn)樽贤饩€(xiàn)會(huì)損傷眼睛。
基線(xiàn)噪音這是燈失靈更普遍的故障。氘燈打開(kāi)后有30分鐘的最大噪音，所以每次使用前至少預(yù)熱30分鐘。
換燈時(shí)要注意不能在燈上留下指痕。因?yàn)槲床寥サ闹负墼陂_(kāi)燈后會(huì)引起燈表面永久性的損害。請(qǐng)用軟布或?qū)Ｓ貌羚R紙握住燈，在開(kāi)燈之前用棉簽蘸取甲醇擦去。新裝上后至少要點(diǎn)燃1小時(shí)以上，才能開(kāi)始定量分析。
池故障與解決
氣泡是最常見(jiàn)故障。瞬間而過(guò)的氣泡會(huì)在色譜圖上出現(xiàn)長(zhǎng)噪音尖峰。若感覺(jué)到有氣泡，當(dāng)將等調(diào)整670nm左右，戴上防護(hù)眼鏡便可以看到池內(nèi)有一個(gè)圓環(huán)，并不是清晰地綠色圖像。流動(dòng)相脫氣不足會(huì)產(chǎn)生氣泡，池污染會(huì)使得故障加重。用充分脫氣的流動(dòng)相可以帶走氣泡，或用強(qiáng)溶劑通過(guò)系統(tǒng)。在正相和反向系統(tǒng)轉(zhuǎn)換的時(shí)候一定要過(guò)渡。
檢測(cè)器阻塞有下列現(xiàn)象
系統(tǒng)壓力升高，松開(kāi)檢測(cè)器進(jìn)口的接頭壓力降至正常水平。檢測(cè)器部分易發(fā)生的地方為進(jìn)口管道或熱交換器、池本身和出口管道。用一般的凈化的溶劑去掉阻塞可能不奏效但可以試試。若是廠(chǎng)家標(biāo)明耐高壓，可用泵打溶劑反沖，?？梢匀サ舳氯毫Σ灰^(guò)6MPa.正常的池不可用此法，一般情況請(qǐng)咨詢(xún)廠(chǎng)家的維護(hù)工程師較好。
池阻塞和污染，如確定是池堵塞，可用注射器回抽溶劑或用泵反沖（耐高壓），一般能疏通。通常此故障較少發(fā)生，而污染是經(jīng)常發(fā)生的。池污染一般是色譜圖的噪音增大，靈敏度降低甚至不出峰，也提高了氣泡的故障率。清洗池前向拆去柱和排空管道，準(zhǔn)備好防護(hù)用品，如眼睛、圍裙、橡膠手套等。池進(jìn)出口都接上細(xì)管徑的聚乙烯管。進(jìn)口管上接10ml的注射器，出口管沒(méi)入異丙醇中。清洗程序如下：回抽10ml異丙醇通過(guò)池去掉流動(dòng)相殘留。 回抽10ml蒸餾水 回抽10ml6mol/L硝酸，通過(guò)池去掉沉積物，此步應(yīng)小心，要備有防止酸溢出的應(yīng)急措施 回抽20ml蒸餾水 至少用100mlHPLC級(jí)別的水正向通過(guò)池。
池滲漏可能發(fā)生在接頭、池窗的密封墊上，也可能發(fā)生在樣品池或參比池的一側(cè)，或者是石英窗破裂。除了接頭松動(dòng)，池滲漏也可能是管道阻塞、流速較高、池后的阻力大，使池的橫截面承受過(guò)高的壓力，嚴(yán)重地引起池破裂。也可能組裝不當(dāng)、墊圈不密封造成的滲漏等。沒(méi)有多大把握最好請(qǐng)廠(chǎng)家來(lái)維護(hù)。
測(cè)量和參比池配合不當(dāng)，正常情況下UV檢測(cè)器用空氣做參比，電路設(shè)計(jì)也無(wú)流動(dòng)相本地。用有紫外吸收的流動(dòng)相通過(guò)UV檢測(cè)器，或是用示差折光檢測(cè)器都要在參比池內(nèi)注滿(mǎn)流動(dòng)相。如參比池中流動(dòng)相不與測(cè)量池中的流動(dòng)相一樣，本底輸出信號(hào)不為零，進(jìn)樣時(shí)有可能出偽峰或倒峰。從濕參比池?fù)Q成空氣參比池時(shí)，要清洗干凈后用干燥的氮?dú)獯蹈?，不能留下溶劑殘留，否則就出“氣泡樣”的故障。
波長(zhǎng)方面的問(wèn)題主要是次級(jí)發(fā)射效應(yīng)、選擇波長(zhǎng)不正確、波長(zhǎng)的裝置差、波長(zhǎng)校正問(wèn)題、低波長(zhǎng)測(cè)量問(wèn)題和單色器等問(wèn)題。
次級(jí)發(fā)射效應(yīng)在可見(jiàn)光范圍內(nèi)，使用氘燈做光源可提高靈敏度，但是帶來(lái)了次級(jí)發(fā)射效應(yīng)。單色器能發(fā)射比設(shè)定值高一級(jí)的發(fā)射光，正好是設(shè)定值的一半。如設(shè)定值在405nm，次級(jí)發(fā)射光正好是202.5nm，三級(jí)發(fā)射光低于干擾波長(zhǎng)之下，由于大氣中的氧所吸收。次級(jí)發(fā)射光正好在紫外光范圍內(nèi)，即是檢測(cè)器在兩種波長(zhǎng)下檢測(cè)，違反了比爾定律，結(jié)果是非線(xiàn)性的。我們可以用鎢燈在紫外范圍內(nèi)無(wú)次級(jí)發(fā)射，但是靈敏度下降。用氘燈在高于360nm測(cè)定，應(yīng)考慮有次級(jí)發(fā)射的可能。在熒光檢測(cè)器中，也有這個(gè)問(wèn)題存在。
選擇波長(zhǎng)不正確可影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的精確性，如有可能應(yīng)選擇在干擾組分的吸收光譜平穩(wěn)的范圍或組分的最高吸收處。在所選波長(zhǎng)太靠近流動(dòng)相的吸收范圍，梯度洗脫時(shí)會(huì)增加基線(xiàn)漂移。
波長(zhǎng)的裝置差，可變波長(zhǎng)UV檢測(cè)器所采用的機(jī)械轉(zhuǎn)動(dòng)光柵選擇波長(zhǎng)。旋轉(zhuǎn)和光柵間的傳動(dòng)裝置由齒輪和桿組成，用久了會(huì)機(jī)械磨損，所選的波長(zhǎng)并不真正是您選擇的波長(zhǎng)。
波長(zhǎng)校正問(wèn)題我們可以用鉻酸鉀在275nm校正吸收波長(zhǎng)等方法來(lái)處理。
低波長(zhǎng)測(cè)量問(wèn)題是我們?cè)诓捎玫筒ㄩL(zhǎng)時(shí)，樣品和流動(dòng)相的變化比在高波長(zhǎng)下更靈敏。我們要選擇應(yīng)選擇低波長(zhǎng)吸收較小的溶劑，通常是乙腈好于甲醇。
單色器問(wèn)題主要是光柵和鏡子蒙上一層污染物，一般這種情況請(qǐng)廠(chǎng)家維護(hù)較好。
g.時(shí)間常數(shù)是相應(yīng)時(shí)間的設(shè)定，起著過(guò)濾噪音的作用。有些有固定的時(shí)間常數(shù)，有些需要自己設(shè)定。如果太小可能增加短噪音，時(shí)間常數(shù)太大可能出寬峰、峰拖尾和短峰。可用自己的經(jīng)驗(yàn)估算時(shí)間常數(shù)，即選最窄的有關(guān)峰寬的10%作為時(shí)間常數(shù)。
泵噪音主要引起檢測(cè)器折射率的變化與流動(dòng)相的組成、壓力以及溫度由引起的噪音。一般情況要加阻尼器，特別是RI檢測(cè)器對(duì)波動(dòng)十分敏感。
溫度的影響，主要是環(huán)境溫度變化常引起基線(xiàn)漂移，一般情況請(qǐng)使用柱溫箱等設(shè)施或環(huán)境溫度波動(dòng)的控制。
混合問(wèn)題，主要是流動(dòng)相不完全混合可出現(xiàn)周期性的基線(xiàn)變化，在示差折光檢測(cè)器非常嚴(yán)重，如果改用手動(dòng)混合相對(duì)較好。特別是比例懸殊太大時(shí)最明顯。
線(xiàn)性問(wèn)題，主要因?yàn)闄z測(cè)器或方法上的問(wèn)題，非線(xiàn)性響應(yīng)是可能的。如仔細(xì)稀釋樣品、選擇波長(zhǎng)，良好的方法可以延長(zhǎng)線(xiàn)性范圍。檢查線(xiàn)性要在一定的濃度范圍內(nèi)，用不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品證實(shí)線(xiàn)性的相關(guān)性；用幾乎澄清的溶劑做流動(dòng)相可擴(kuò)展線(xiàn)性范圍，用強(qiáng)紫外吸收的流動(dòng)相檢測(cè)器線(xiàn)性范圍幾乎不到零，建議用無(wú)吸收的流動(dòng)相或在流動(dòng)相無(wú)吸收的波長(zhǎng)下檢測(cè)。
信號(hào)線(xiàn)故障主要是記錄器和數(shù)據(jù)系統(tǒng)連接檢測(cè)器的信號(hào)線(xiàn)引起的。要注意正負(fù)是否接對(duì)或線(xiàn)路松動(dòng)、接觸不良。另外就是有良好的接地裝置。
內(nèi)部自檢沒(méi)有通過(guò)，我們可以通過(guò)其提示信息參閱手冊(cè)來(lái)解決，最好咨詢(xún)廠(chǎng)家維護(hù)工程師。
